Diferența cheie - Citometrie de flux față de FACS

În contextul teoriei celulelor, celulele reprezintă unitatea structurală și funcțională de bază a tuturor organismelor vii. Sortarea celulelor este o metodologie care este utilizată pentru a separa diferite celule în funcție de caracteristicile fiziologice și morfologice. Pot avea caracteristici intracelulare sau extracelulare. Interacțiunea ADN-ului, ARN-ului și proteinelor sunt considerate proprietăți interactive intracelulare, în timp ce forma, dimensiunea și diferite proteine ​​de suprafață sunt considerate proprietăți extracelulare. În știința actuală, metodologiile de sortare a celulelor au condus la asistența la diferite investigații în studii biologice și, de asemenea, la stabilirea de noi principii prin cercetarea în medicină. Sortarea celulelor se realizează pe diverse metodologii, care includ atât primitive cu mai puține echipamente, cât și metodologii tehnologice avansate cu utilizarea unor mașini sofisticate. Citometria cu flux, sortarea de celule fluorescente activate (FACS), selecția celulelor magnetice și sortarea celulelor unice sunt metodologiile principale utilizate. Citometria de flux și FACS sunt dezvoltate pentru a diferenția celulele în funcție de proprietățile lor optice. FACS este un tip specializat de citometrie a fluxului. Citometria de flux este o metodologie care este utilizată în timpul analizei unei populații eterogene de celule în funcție de diferite molecule de suprafață celulară, dimensiunea și volumul, care permite investigarea celulelor unice. FACS este un proces prin care un amestec de celule eșantion este sortat în funcție de caracteristicile lor de împrăștiere a luminii și de fluorescență în două sau mai multe recipiente. Aceasta este diferența cheie între citometria fluxului și FACS.

CUPRINS

1. Prezentare generală și diferență de cheie 2. Ce este Citometria de flux 3. Ce este FACS 4. Asemănări între citometrie de flux și FACS 5. Comparație cot la cot - Citometrie de flux față de FACS în forma tabulară 6. Rezumat

Ce este Citometria debitului?

Citometria de flux este o metodă care este utilizată pentru a examina și determina expresia moleculelor intracelulare și a suprafeței celulare și pentru a defini și caracteriza tipuri de celule distincte. De asemenea, este utilizat pentru determinarea volumului și dimensiunii celulelor și pentru evaluarea purității subpopulațiilor izolate. Aceasta permite evaluarea multi-parametru a celulelor unice în același timp. Citometria cu flux este utilizată pentru măsurarea intensității fluorescenței care este produsă datorită anticorpilor marcați fluorescent care ajută la identificarea proteinelor sau a liganzilor care se leagă de celulele asociate.

În general, citometria de flux include în principal trei sub-sisteme. Ele sunt fluidice, electronice și optică. În citometria fluxului, sunt disponibile cinci componente principale care sunt utilizate în sortarea celulelor. Ele sunt, o celulă de curgere (un flux de lichid care este utilizat pentru transportul și alinierea celulelor pentru procesul de detectare optică), un sistem de măsurare (poate fi din diferite sisteme inclusiv, lămpi cu mercur și xenon, răcire cu apă de mare putere sau lasere cu rază redusă de putere sau lasere cu diodă), un ADC; Sistem analog convertor digital, sistem de amplificare și computer pentru analiză. Achiziția este procesul prin care datele sunt colectate din eșantioane cu ajutorul unui citometru de debit. Acest proces este mediat de un computer care este conectat cu citometrul de debit. Software-ul prezent în computer analizează informațiile furnizate computerului de la citometrul de flux. Software-ul are, de asemenea, capacitatea de a regla parametrii experimentului care controlează citometrul de debit.

Ce este FACS?

În contextul citometriei cu flux, sortarea de celule cu fluorescență (FACS) este o metodă care este utilizată pentru diferențierea și sortarea unui eșantion dintr-un amestec de celule biologice. Celulele sunt separate de două sau mai multe recipiente. Metoda de sortare se bazează pe caracteristicile fizice ale celulei care include caracteristicile de împrăștiere a luminii și de fluorescență. Aceasta este o tehnică științifică importantă, care poate fi utilizată pentru a obține rezultate cantitative și calitative fiabile ale semnalelor de fluorescență care sunt emise de la fiecare celulă. În timpul FACS, inițial, amestecul pre-obținut de celule; o suspensie este îndreptată spre centrul unui flux îngust de lichid care curge rapid. Fluxul de lichid este proiectat pentru a separa celulele din suspensie în funcție de diametrul fiecărei celule. Un mecanism de vibrație este aplicat fluxului de suspensie care duce la formarea picăturilor individuale.

Sistemul este calibrat pentru a crea o singură picătură cu o celulă. Chiar înainte de formarea picăturilor, suspensia de flux se deplasează de-a lungul unui aparat de măsurare a fluorescenței care detectează caracteristicile fluorescenței fiecărei celule. În punctul de formare a picăturilor, este plasat un inel de încărcare electrică pe care o sarcină este indusă la inel înainte de măsurarea intensității fluorescenței. Odată ce picăturile sunt formate din fluxul de suspensie, o sarcină este prinsă în picăturile care apoi intră într-un sistem de deviere electrostatică. Conform tarifului, sistemul deviază picăturile în diferite containere. Metoda de aplicare a taxei variază în funcție de diferite sisteme utilizate în FACS. Echipamentul utilizat în FACS este cunoscut sub numele de sortator de celule activat cu fluorescență.

Care este asemănarea dintre citometria debitului și FACS?


  • Citometria de flux și FACS sunt dezvoltate pentru a diferenția celulele în funcție de proprietățile lor optice.

Care este diferența dintre citometria debitului și FACS?

Rezumat - Citometrie de flux vs FACS

Celula este unitatea structurală și funcțională de bază a tuturor organismelor vii. Sortarea celulelor este procesul prin care celulele sunt izolate și diferențiate în diferite categorii în funcție de proprietățile lor intracelulare și extracelulare. Citometria de flux și FACS sunt două metodologii importante în sortarea celulelor. Ambele procese sunt dezvoltate pentru a diferenția celulele în funcție de proprietățile lor optice. Citometria de flux este o metodologie care este utilizată în timpul analizei unei populații eterogene de celule în funcție de diferite molecule de suprafață celulară, dimensiunea și volumul, care permite investigarea celulelor unice. FACS este un proces prin care un amestec de celule eșantion este sortat în funcție de caracteristicile lor de împrăștiere a luminii și de fluorescență în două sau mai multe recipiente. Aceasta este diferența dintre citometria cu flux și FACS.

Descărcați versiunea PDF a fluxului de citometrie și FACS

Puteți descărca versiunea PDF a acestui articol și o puteți folosi în scopuri offline, conform notei de citare. Vă rugăm să descărcați versiunea PDF aici Diferența dintre citometria debitului și FACS

Referinţă:

  1. Citometrie de flux (FCM) / FACS | Sortarea celulelor activate prin fluorescență (FACS). Accesat 22 septembrie 2017. Disponibil aici Ibrahim, Sherrif F. și Ger van den Engh. „Citometrie de flux și sortare de celule.” SpringerLink, Springer, Berlin, Heidelberg, 1 ianuarie 1970. Accesat 22 septembrie 2017. Disponibil aici

Imagine amabilitate:


  1. 'Citometru' By Kierano - Lucrare proprie, (CC BY 3.0) prin Commons Wikimedia 'Sortare de celule asistate prin fluorescență (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Dezvoltarea unui sistem de model in vitro pentru studierea interacțiunii Equus caballus IgE cu receptorul său de înaltă afinitate FcεRI (teză de doctorat), Universitatea din Sheffield, (CC BY-SA 3.0) prin Commons Wikimedia